孔雀石綠殘留快速檢測技術

1 什么是孔雀石綠?

孔雀石綠作為染色劑常被用于皮革業(yè)、紡織業(yè)、制陶業(yè)、食品和生物等領域，是人工合成的三苯甲烷類化學物。同時，孔雀石綠也可以作為殺菌劑、驅蟲劑，用于預防與治療水生動物的細菌、真菌和寄生蟲感染，由于其成本低廉且*，因此被普遍用于水產養(yǎng)殖業(yè)。然而隨著研究的深入，孔雀石綠高毒性、高殘留的性質及潛在的致畸、致癌、致突變等毒副作用備受研究人員和消費者關注。鑒于孔雀石綠潛在的致癌性，美國、加拿大、日本、歐盟等國家將其列為水產養(yǎng)殖禁用藥物。歐盟法案2002/675/EC規(guī)定，動物源性食品中MG(孔雀石綠)和LMG(無色孔雀石綠)殘留*為2μg/kg;日本肯定列表明確規(guī)定，在進口水產品中不得檢出MG殘留。我國于2002年5月將孔雀石綠列入《食品動物禁用的獸藥及其他化合物清單》，并于2005年制定了孔雀石綠的使用標準，規(guī)定水產品中的MG和LMG的殘留總*不得超過1μg/kg。盡管如此，違規(guī)使用孔雀石綠的事件仍然時有發(fā)生——歐盟、日本、中國香港等國家和地區(qū)均曾從由我國大陸進口的鰻魚中檢測出MG和LMG殘留，這不僅影響生態(tài)環(huán)境，還會成為制約我國大陸地區(qū)食品質量安全和市場競爭力的重要因素。

 

2 檢測技術的應用

孔雀石綠進入動物體內后會快速代謝為無色孔雀石綠，而無色孔雀石綠為脂溶性物質，相較孔雀石綠而言毒性更強，且基本無法代謝。國內外均以孔雀石綠及其代謝物無色孔雀石綠的總量為測定指標，目前測定方法主要有儀器分析測定法(高效液相法、液相色譜質譜聯(lián)用法等)、免疫學檢測技術(酶聯(lián)免疫檢測技術、膠體金檢測技術等)，以及微光探測與免疫學技術的結合方法(熒光定量檢測技術)等。對于快速篩查市場而言，后兩種方法已逐漸成為檢測應用的主流手段。

 

2.1 儀器分析法

儀器分析法主要是指利用氣相色譜法、氣相色譜-串聯(lián)質譜法、液相色譜法、高效液相色譜-串聯(lián)質譜法或各類光譜儀等大型精密儀器來進行藥物殘留的分析方法。這是一種準確性高、靈敏度高、特異性好、選擇性強的檢測方法，現普遍用于檢測獸藥和農藥殘留，許多國家和地區(qū)已將高效液相色譜-串聯(lián)質譜法作為檢測水產品中孔雀石綠殘留的確證方法。但是，此方法不僅需要使用昂貴的檢測儀器，還需專業(yè)技術人員進行操作，無法實現大批量快速檢測。同時，該方法成本相對較高，且不具備現場快速篩查的相關條件。

 

2.2 免疫學檢測技術

免疫學檢測技術利用抗原與抗體的特異性結合原理，相較于儀器分析法而言，其大的優(yōu)勢為操作便捷，有利于實現市場的快速篩查。現階段，用于食品安全的免疫學檢測技術主要有酶聯(lián)免疫檢測技術和膠體金檢測技術。

 

2.2.1 酶聯(lián)免疫檢測技術

該技術的原理是應用抗原和抗體的特異結合與酶催化作用的有機結合，利用酶促反應原理放大了免疫檢測的效果，在具有較高靈敏度的同時還具備了定量檢測的特性。這一檢測技術的優(yōu)點是檢測靈敏度高、特異性好、高通量和高精密度，且無需大型儀器設備就可進行大批量的樣品初篩檢測。該法雖然較儀器法具有一定優(yōu)勢，但由于其檢測時需專業(yè)人員操作，且檢測時間較長，亦無法滿足現場快速篩查的需求。

 

2.2.2 膠體金檢測技術

膠體金檢測技術是以納米金顆粒作為示蹤標識物，利用抗原和抗體具有特異性結合的原理所建立的新型免疫標記技術，是色譜層析技術和納米金技術的有機結合。該技術的優(yōu)點是操作簡單、檢測時間短且無需專業(yè)技術人員操作，因此膠體金技術被廣泛應用于大分子類蛋白、農藥殘留、獸藥殘留、小分子類藥物和毒素類等的快速檢測中。雖然膠體金法具有一定的優(yōu)勢，但由于其靈敏度較差，有漏檢風險，仍無法滿足國家檢測標準的要求。

 



 

深芬儀器生產的CSY-JAS水產品孔雀石綠檢測儀應用競爭抑制免疫層析的原理，通過檢測線熒光定量卡中的熒光強弱程度，定量分析待檢樣品中孔雀石綠殘留含量。